배경HLA 교차시험(HLA crossmatch, HLA-XM) 표준화를 위한 설문조사의 자료를 분석하여 HLA-XM을 시행하는 국내 기관의 현황을 파악하고, 나아가 HLA-XM의 표준화를 이루기 위한 기초 자료로 사용하고자 하였다.
방법2015년 8월을 기준으로 국내 HLA 검사 신빙도조사 중 HLA-XM에 참여하고 있는 51개의 의료기관을 대상으로 설문조사를 시행하여, 응답한 50개 기관을 대상으로 결과를 분석하였다. 설문 항목은 1) 시행 중인 HLA-XM 종류와 연간 검사 건수, 2) HLA-XM에 사용하는 검체의 종류와 림프구 분리방법, 3) 보체의존성 세포 독성 교차시험(complement-dependent cytotoxicity crossmatch, CDC-XM) 및 유세포분석 교차시험(flow cytometry crossmatch, FCXM)의 검사방법 및 시약에 대해 조사하였다.
결과Anti-human globulin (AHG) CDC-XM (47/49, 96%)과 FCXM(30/50, 60%)을 시행하고 있는 기관은 2005년 설문조사(AHG CDC-XM, 35/43, 81%; FCXM, 7/44, 16%)에 비해 현저히 증가하였다. 연간 검사건수에서 50% 이상의 기관이 50건 이하를 실시하는 소규모 검사실에 속했고, 연간 500건을 넘는 검사를 실시하는 곳은 10%에 불과했다. 세포 분리방법에 있어서는 CDC-XM을 실시하는 기관의 43% (21/49)에서 negative selection 방법을 사용하고 있었다. 혈청 1 µL당 반응시키는 세포 수는 CDC-XM (1,000–8,000)과 FCXM (1,300–20,000) 모두에서 넓은 범위의 분포를 보였다. FCXM의 결과 판정에서 log 형광값 비율(log fluorescence ratio)을 사용하는 기관(26/30, 87%)이 channel shift 값을 사용하는 기관(5/30, 17%)에 비해 더 많았다.
결론CDC-XM과 FCXM 모두에서 서로 다른 기관에서 사용하는 검사방법이나 판정 기준에 상당한 차이가 있는 것이 확인되었다. 기관별 검사결과의 차이를 줄이기 위하여 HLA-XM의 표준화 작업을 지속적으로 시행하여야 할 것이다.
BackgroundWe carried out a questionnaire survey for laboratories performing human leukocyte antigen-crossmatch (HLA-XM) to provide a basis for laboratory standardization of HLA-XM tests in Korea.
MethodsThe questionnaires were distributed to 51 HLA laboratories participating in the HLA-XM part of the HLA proficiency survey program organized by the Korean Society for Laboratory Medicine and replies from 50 laboratories were analyzed. The questionnaires included following items: 1) HLA-XM methods performed and annual number of tests, 2) types of the specimen and lymphocyte separation methods, 3) test procedures and reagents for complement-dependent cytotoxicity crossmatch (CDC-XM) and flow cytometry crossmatch (FCXM).
ResultsThe number of laboratories performing anti-human globulin (AHG) CDC-XM (47/49, 96%) and FCXM (30/50, 60%) was considerably increased compared to the 2005 survey (AHG CDC-XM, 35/43, 81%; FCXM, 7/44, 16%). As for the annual number of XM tests, more than 50% of the laboratories were low volume laboratories performing ≤50 tests, and only 10% of the laboratories were performing >500 tests. For cell isolation methods, negative selection was used by 43% (21/49) of laboratories performing CDC-XM. Number of cells reacted per 1 µL of serum varied among different laboratories in both CDC-XM (1,000–8,000) and FCXM tests (1,300–20,000). For the interpretation of FCXM, log fluorescence ratio (26/30, 87%) was more commonly used than channel shift values (5/30, 17%).
ConclusionsConsiderable variation is noted in both CDC-XM and FCXM methods performed by different laboratories. A continuous effort for laboratory standardization is needed to reduce inter-laboratory variation in the HLA-XM test results.
Keywords
Questionnaire survey; HLA crossmatch; Complement-dependent cytotoxicity; Flow cytometry; Standardization